Biochemical and genetic analysis of methylenetetrahydrofolate reductase in Leishmania metabolism and virulence

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Cloned(Commentary)

Commentary	Organism
-	Leishmania major

Engineering

Amino acid exchange	Commentary	Organism
additional information	enzyme null mutants lack 5-methyltetrahydrofolate and cannot utilize exogenous homocysteine for growth. In mouse model of infection, null mutants show good infectivity and virulence	Leishmania major

Inhibitors

Inhibitors	Commentary	Organism	Structure
additional information	not inhibitory: S-adenosyl-L-methionine, no substrate inhibition up to 0.25 mM	Leishmania major	-

Organism

Organism	Primary Accession No. (UniProt)	Commentary	Textmining
Leishmania major	-	expression in Saccharomyces cerevisiae	-

Posttranslational Modification

Posttranslational Modification	Commentary	Organism
additional information	protein sequence shows no obvious intracellular targeting sequences	Leishmania major

Substrates and Products (Substrate)

Substrates	Commentary Substrates	Literature (Substrates)	Organism	Products	Commentary (Products)	Literature (Products)	Organism (Products)	Reversibility
5-methyltetrahydrofolate + NAD+	-	674719	Leishmania major	5,10-methylenetetrahydrofolate + NADH	-	-	-	?
5-methyltetrahydrofolate + NADP+	-	674719	Leishmania major	5,10-methylenetetrahydrofolate + NADPH	-	-	-	?
5-methyltetrahydrofolate + oxidized menadione	-	674719	Leishmania major	5,10-methylenetetrahydrofolate + reduced menadione	-	-	-	?

Subunits

Subunits	Commentary	Organism
?	x * 34800, calculated	Leishmania major

Turnover Number [1/s]

Turnover Number Minimum [1/s]	Turnover Number Maximum [1/s]	Substrate	Commentary	Organism	Structure
52	-	NADH	phosphate buffer	Leishmania major
74	-	NADPH	phosphate buffer	Leishmania major
87	-	NADH	Tris buffer	Leishmania major
140	-	NADPH	Tris buffer	Leishmania major

Cofactor

Cofactor	Commentary	Organism	Structure
NADH	dual-cofactor specificity with NADH and NADPH under physiological conditions	Leishmania major
NADPH	dual-cofactor specificity with NADH and NADPH under physiological conditions	Leishmania major

Cloned(Commentary) (protein specific)

Commentary	Organism
-	Leishmania major

Cofactor (protein specific)

Cofactor	Commentary	Organism	Structure
NADH	dual-cofactor specificity with NADH and NADPH under physiological conditions	Leishmania major
NADPH	dual-cofactor specificity with NADH and NADPH under physiological conditions	Leishmania major

Engineering (protein specific)

Amino acid exchange	Commentary	Organism
additional information	enzyme null mutants lack 5-methyltetrahydrofolate and cannot utilize exogenous homocysteine for growth. In mouse model of infection, null mutants show good infectivity and virulence	Leishmania major

Inhibitors (protein specific)

Inhibitors	Commentary	Organism	Structure
additional information	not inhibitory: S-adenosyl-L-methionine, no substrate inhibition up to 0.25 mM	Leishmania major	-

Posttranslational Modification (protein specific)

Posttranslational Modification	Commentary	Organism
additional information	protein sequence shows no obvious intracellular targeting sequences	Leishmania major

Substrates and Products (Substrate) (protein specific)

Substrates	Commentary Substrates	Literature (Substrates)	Organism	Products	Commentary (Products)	Literature (Products)	Organism (Products)	Reversibility
5-methyltetrahydrofolate + NAD+	-	674719	Leishmania major	5,10-methylenetetrahydrofolate + NADH	-	-	-	?
5-methyltetrahydrofolate + NADP+	-	674719	Leishmania major	5,10-methylenetetrahydrofolate + NADPH	-	-	-	?
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Subunits (protein specific)

Subunits	Commentary	Organism
?	x * 34800, calculated	Leishmania major

Turnover Number [1/s] (protein specific)

Turnover Number Minimum [1/s]	Turnover Number Maximum [1/s]	Substrate	Commentary	Organism	Structure
52	-	NADH	phosphate buffer	Leishmania major
74	-	NADPH	phosphate buffer	Leishmania major
87	-	NADH	Tris buffer	Leishmania major
140	-	NADPH	Tris buffer	Leishmania major

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689031	Munoz		Methylenetetrahydrofolate redu ...	Homo sapiens	Mol. Hum. Reprod.	13	419-424	2007	-	-	-	-	1	-	-	-	-	-	-	-	-	1	-	-	-	-	-	1	-	-	1	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	1	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	1	-	-	1	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
689078	Kasap		Molecular phylogenetic analysi ...	Agrobacterium tumefaciens, Aquifex aeolicus, Arabidopsis thaliana, Aspergillus oryzae, Bacteroides thetaiotaomicron, Bifidobacterium longum, Bordetella bronchiseptica, Bordetella parapertussis, Bos taurus, Bradyrhizobium japonicum, Brucella suis, Caenorhabditis elegans, Candida albicans, Candida glabrata, Candidatus Blochmannia floridanus, Caulobacter vibrioides, Chromobacterium violaceum, Collimonas fungivorans, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium glutamicum, Coxiella burnetii, Desulfovibrio vulgaris, Dictyostelium discoideum, Emericella nidulans, Escherichia coli, Gibberella zeae, Gloeobacter violaceus, Homo sapiens, Leptospira interrogans, Macaca fascicularis, Macaca mulatta, Magnaporthe grisea, Mesorhizobium loti, Methanosarcina mazei, Mus musculus, Oryza sativa, Pasteurella multocida, Photorhabdus luminescens, Prochlorococcus marinus, Pseudomonas syringae, Ralstonia solanacearum, Rattus norvegicus, Rhodopirellula baltica, Rhodopseudomonas palustris, Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Shigella flexneri, Sinorhizobium meliloti, Streptococcus pneumoniae, Tetraodon nigroviridis, Thermus thermophilus, Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Wolinella succinogenes, Xenopus laevis, Xylella fastidiosa, Zea mays	Mol. Phylogenet. Evol.	42	838-846	2007	-	-	-	-	2	-	-	-	-	-	-	-	-	58	-	-	-	-	-	-	-	-	58	-	-	-	-	-	-	-	-	58	-	-	-	-	-	-	58	-	2	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	58	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
689111	Kim		The interactive effect of meth ...	Homo sapiens	Mutat. Res.	622	14-18	2007	-	-